TIS11D Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405406-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TIS11DO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TIS11D (h) e o Plasmídeo Double Nickase TIS11D (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ZFP36L2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TIS11D Anticorpo (A-3): sc-365908
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TIS11D Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405406-NIC | 20 µg | $410.00 |
O ZFP36L2 humano codifica a proteína de ligação a RNA TIS11D, um fator de dedo de zinco do tipo CCCH que reconhece elementos ricos em AU nas regiões 3′ UTR para promover a deadenilação e a degradação de mRNAs. Por meio da regulação da estabilidade de transcritos, a TIS11D molda programas de expressão gênica ligados ao desenvolvimento, à ativação e à diferenciação de linfócitos, intersectando-se com a sinalização inflamatória associada a MAPK e NF-κB e com redes mais amplas de controle pós-transcricional. O ZFP36L2 tem sido implicado na homeostase imune e em fenótipos oncogênicos em contextos hematológicos, nos quais alterações no turnover de RNA podem influenciar proliferação, apoptose e comprometimento de linhagem. Essas características fazem do ZFP36L2 um nó útil para dissecar vias de degradação de RNA e resultados transcricionais relacionados ao sistema imune em modelos celulares humanos.
TIS11D O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZFP36L2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZFP36L2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZFP36L2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZFP36L2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.