TIF1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403230
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TIF1γ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TIF1γ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TIF1γ Anticorpo (XX-19): sc-101179
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TIF1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403230 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TRIM33 codifica a TIF1γ, um regulador transcricional e ligase E3 de ubiquitina da família tripartite motif (TRIM) que integra o controle gênico dependente de cromatina com a transdução de sinais. A TIF1γ modula a sinalização TGF-β/SMAD ao regular a disponibilidade de SMAD4 e influencia programas transcricionais específicos de linhagem por meio de interações com correpressores e com a maquinaria epigenética. Ela também contribui para a estabilidade do genoma e para respostas a danos no DNA, conectando o controle transcricional a vias celulares de estresse. A atividade desregulada de TRIM33 tem sido associada a alterações na diferenciação e a contextos de sinalização oncogênica, tornando-a relevante para estudos mecanísticos em biologia do câncer e na regulação do desenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TIF1γ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRIM33 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRIM33, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRIM33 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TIF1γ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRIM33 para a investigação da sinalização de TIF1γ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRIM33 críticos para a função TIF1γ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRIM33 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TIF1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TIF1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRIM33. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TIF1γ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TIF1γ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRIM33 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRIM33 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.