Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TIEG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402480
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TIEG1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TIEG1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TIEG1 Anticorpo (95-D): sc-130408
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TIEG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402480 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KLF10 codifica a TIEG1 (proteína 1 de resposta precoce ao crescimento induzível por TGF-β), um fator de transcrição do tipo Krüppel com dedos de zinco que integra a sinalização de TGF-β/SMAD com o controle, dependente do contexto, da progressão do ciclo celular, da diferenciação e da apoptose. A TIEG1 regula programas transcricionais envolvidos na remodelação da matriz extracelular e no comprometimento de linhagem, e pode modular o crosstalk com vias de sinalização MAPK e hormonal em contextos de células epiteliais, ósseas e imunes. A atividade alterada de KLF10/TIEG1 tem sido associada a respostas fibróticas desreguladas, função aberrante de osteoblastos e remodelação óssea, bem como a mudanças em redes transcricionais supressoras de tumor, tornando-a relevante para estudos mecanísticos do controle da proliferação e da homeostase tecidual. Seu papel como fator de resposta precoce a posiciona como um nó útil para dissecar a regulação gênica dependente de estímulo e o encadeamento de vias a jusante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TIEG1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KLF10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KLF10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KLF10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TIEG1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KLF10 para a investigação da sinalização de TIEG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KLF10 críticos para a função TIEG1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KLF10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TIEG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TIEG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KLF10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TIEG1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TIEG1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KLF10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KLF10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.