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TICAM-1双切口酶质粒(m) | sc-430672-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TICAM-1双切口酶质粒(m2) | sc-430672-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Ticam1 编码 TICAM-1(亦称 TRIF),是一种胞质适配蛋白,将内体 Toll 样受体与先天免疫信号传导连接起来。TICAM-1 介导 TLR3 和 TLR4 的 TRIF 依赖性通路,驱动 IRF3/IRF7 与 NF-κB 的激活,从而诱导 I 型干扰素和促炎性细胞因子的产生。通过调控抗病毒反应、树突状细胞成熟以及程序性炎症信号,TICAM-1 有助于塑造宿主防御与免疫稳态。TICAM1/TRIF 信号失调与炎症性及感染性疾病的发生机制有关,因此它是在小鼠模型中解析先天免疫对病理过程贡献的重要靶点。
TICAM-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ticam1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ticam1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ticam1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ticam1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。