Thyroperoxidase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423484

개요

마우스 Tpo는 갑상선 여포 세포의 꼭대기(apical) 막에 존재하는 헴(heme) 의존성 효소인 갑상선 퍼옥시다아제(TPO)를 암호화하며, 요오드화물의 산화와 더불어 티로글로불린의 요오드화 및 결합 반응을 촉매하여 갑상선 호르몬 T3와 T4를 생성한다. TPO 활성은 DUOX/DUOXA와 같은 H2O2 생성 시스템을 통한 산화환원 조절과 함께 요오드화물 수송 및 유기화(organification)를 통합함으로써 호르몬 생합성과 갑상선 여포 항상성을 뒷받침한다. Tpo 의존적 갑상선 호르몬 생성 과정의 교란은 모델 시스템에서 대사 조절 변화, 성장 및 신경발달 관련 표현형과 연관되며, TPO가 주요 항원으로 작용하는 자가면역성 갑상선 병리의 기전적 접근 지점을 제공한다. 이에 따라 Tpo는 갑상선 분화 프로그램, 내분비 피드백 신호전달, 그리고 갑상선 세포에서의 산화 스트레스 반응을 연구하기 위한 기능적 허브로 활용된다.

Thyroperoxidase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tpo 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tpo 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tpo의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Thyroperoxidase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Thyroperoxidase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tpo 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Thyroperoxidase 기능에 중요한 Tpo 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tpo 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Thyroperoxidase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Thyroperoxidase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tpo 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Thyroperoxidase HDR 플라스미드 (m) 및 Thyroperoxidase HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tpo 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tpo 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.