TET2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400545-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TET2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TET2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TET2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TET2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TET2 Anticorpo (C-7): sc-398535
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TET2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400545-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TET2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400545-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TET2 codifica uma dioxigenase dependente de Fe(II)/2-oxoglutarato que catalisa a oxidação da 5-metilcitosina em 5-hidroximetilcitosina e em derivados posteriormente oxidados, promovendo a desmetilação do DNA tanto ativa quanto passiva. Por meio da regulação epigenética de enhancers e de corpos gênicos, a TET2 ajuda a coordenar a diferenciação hematopoética, as decisões de destino de células imunes e programas transcricionais ligados à acessibilidade da cromatina. A atividade de TET2 interage com processos de reparo do DNA e de desmetilação associada à replicação, e é modulada por sinais metabólicos que influenciam a disponibilidade de cofatores para dioxigenases. A disrupção da dinâmica de metilação mediada por TET2 está frequentemente associada a alterações na homeostase das linhagens mieloide e linfoide e é amplamente estudada no contexto da hematopoiese clonal e dos mecanismos de malignidades hematológicas.
TET2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TET2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TET2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TET2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TET2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.