TESPA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406563

Visão geral

TESPA1 (thymocyte-expressed, positive selection-associated 1) codifica uma proteína adaptadora enriquecida em células linfoides que coordena a transdução de sinais a jusante dos recetores de antigénios. Em células T, a TESPA1 contribui para a sinalização proximal do TCR e para a mobilização de cálcio ao ligar o envolvimento do recetor a vias dependentes de PLCγ e à libertação de Ca²⁺ do retículo endoplasmático, moldando assim programas de ativação e a seleção de timócitos. Também está implicada na sinalização do recetor de células B e em redes mais amplas de comunicação entre células imunitárias que influenciam respostas de citocinas e diferenciação. Alterações na atividade da TESPA1 têm sido associadas a fenótipos de desregulação imunitária, incluindo suscetibilidade a mecanismos de doenças autoimunes e inflamatórias, tornando-a relevante para o estudo de limiares de sinalização e da função dos linfócitos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TESPA1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TESPA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TESPA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TESPA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TESPA1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TESPA1 para a investigação da sinalização de TESPA1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TESPA1 críticos para a função TESPA1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TESPA1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TESPA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TESPA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TESPA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TESPA1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TESPA1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TESPA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TESPA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.