TESK2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432964

Descripción general

La quinasa 2 asociada a testículo (TESK2), codificada por el gen murino *Tesk2*, es una quinasa de serina/treonina que regula la dinámica del citoesqueleto de actina al fosforilar e inhibir a cofilina, influyendo así en el recambio de filamentos, la forma celular y la motilidad. La actividad de TESK2 conecta señales de regulación aguas arriba, incluidas las vías de GTPasas de la familia Rho, con procesos de remodelación del citoesqueleto que afectan la adhesión, la migración y el tráfico vesicular. Su expresión está enriquecida en tejidos testiculares y en células germinales, lo que respalda funciones en la espermatogénesis y en la reorganización del citoesqueleto durante la maduración de las células germinales. La señalización de TESK2 desregulada y la remodelación de actina dependiente de cofilina se analizan con frecuencia en modelos de migración celular alterada y arquitectura tisular, lo que aporta relevancia para estudios mecanísticos de trastornos del desarrollo y proliferativos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TESK2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tesk2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tesk2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tesk2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TESK2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tesk2 para la investigación de la señalización de TESK2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tesk2 críticos para la función de TESK2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tesk2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TESK2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TESK2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tesk2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TESK2 (m) y el plásmido HDR TESK2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tesk2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tesk2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.