Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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TDP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405057
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TDP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TDP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TDP1 Anticorpo (C-3): sc-365674
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TDP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405057 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A fosfodiesterase tirosil-DNA 1 (TDP1) é uma enzima nuclear de reparo do DNA que hidrolisa ligações covalentes 3′-fosfotirosil formadas quando a topoisomerase I fica aprisionada no DNA, bem como outras extremidades 3′ do DNA bloqueadas. Por meio da coordenação com as vias de reparo de quebras de fita simples e de reparo por excisão de base, incluindo interações com PARP1, XRCC1 e DNA ligase III, a TDP1 ajuda a restaurar extremidades capazes de serem ligadas e a preservar a estabilidade do genoma durante o estresse de transcrição e replicação. A perda ou o comprometimento da TDP1 prejudica a resolução de adutos Top1-DNA, aumentando o acúmulo de quebras nas fitas de DNA e de lesões associadas à replicação. A disfunção da TDP1 está ligada a fenótipos neurodegenerativos, como a ataxia espinocerebelar com neuropatia axonal, e é amplamente relevante para estudos de tolerância a danos no DNA e de respostas celulares ao estresse genotóxico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TDP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TDP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TDP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TDP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TDP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TDP1 para a investigação da sinalização de TDP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TDP1 críticos para a função TDP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TDP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TDP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TDP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TDP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TDP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TDP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TDP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TDP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.