Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TCF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401584
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TCF-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TCF-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TCF-1 Anticorpo (C-5): sc-271453
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TCF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401584 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TCF7 codifica o TCF-1, um fator de transcrição do tipo HMG-box restrito a células T que integra a sinalização canônica Wnt/β-catenina com programas gênicos que especificam linhagens celulares. O TCF-1 molda o desenvolvimento de timócitos, sustenta a manutenção de progenitores de células T e regula decisões de diferenciação por meio de ativação ou repressão transcricional dependente do contexto, em cooperação com cofatores como β-catenina e Groucho/TLE. Em linfócitos maduros, o TCF-1 influencia estados efetores versus associados à memória e contribui para redes de cromatina e transcrição que governam a homeostase imunológica. A desregulação de programas dependentes de TCF7/TCF-1 tem sido associada a alterações na diferenciação de células imunes e é estudada no contexto de patologias mediadas pelo sistema imune e de reprogramação transcricional associada a neoplasias hematológicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TCF-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TCF7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TCF7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TCF7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TCF-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TCF7 para a investigação da sinalização de TCF-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TCF7 críticos para a função TCF-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TCF7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TCF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TCF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TCF7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TCF-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TCF-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TCF7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TCF7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.