TBZF CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417474

概要

ZNF675は、ヒトタンパク質TBZFをコードしており、転写制御および細胞状態特異的な遺伝子発現プログラムの維持に関与すると考えられている、亜鉛フィンガー型のDNA結合因子（推定）です。核内制御因子である可能性が高いTBZFは、プロモーター／エンハンサー活性、転写抑制または活性化、ならびに下流のシグナル応答性遺伝子ネットワークの協調といった、クロマチン関連プロセスに影響を及ぼすことが予想されます。亜鉛フィンガー型転写因子の機能異常は、分化・増殖・ストレス応答経路の変化と結び付くことが多く、ZNF675は、疾患に関連する細胞表現型における遺伝子制御機構を解明するための機構的研究の対象として有用です。TBZFの機能を調べることで、転写回路がゲノム安定性や細胞恒常性を司るより広範な経路とどのように統合されているかを明らかにする手がかりになります。

TBZF CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZNF675遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZNF675内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZNF675のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TBZFタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TBZFシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZNF675欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TBZFの機能に不可欠なZNF675エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZNF675ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TBZF CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTBZF CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZNF675遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TBZF HDRプラスミド（h）および TBZF HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZNF675ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZNF675標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。