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TBL1XR1CRISPR激活质粒(h) | sc-401998-ACT | 20 µg | $397.00 |
TBL1XR1(转导蛋白β样1,X连锁受体1)编码一种含WD40重复序列的共调节因子,可通过连接序列特异性转录因子与染色质修饰复合体参与转录调控。它在多种信号通路背景下发挥作用,包括核受体通路以及与Wnt/β-连环蛋白相关的转录,并通过促进共抑制子与共激活子复合体的动态交换来微调基因表达程序。通过这些作用,TBL1XR1影响细胞分化、增殖以及应激反应相关的转录状态。TBL1XR1的失调或活性改变与癌症生物学中的异常转录网络以及神经发育表型有关,因此成为开展基因调控机制研究的有用靶点。
TBL1XR1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TBL1XR1的表达。
TBL1XR1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TBL1XR1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TBL1XR1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TBL1XR1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TBL1XR1位点,并能够研究内源性位点上依赖于TBL1XR1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TBL1XR1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TBL1XR1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。