Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TARM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-434122
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TARM1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TARM1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TARM1 Anticuerpo (B-4): sc-514218
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TARM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-434122 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tarm1 codifica TARM1, un inmunorreceptor expresado predominantemente en células del linaje mieloide, donde actúa como una molécula de señalización en la superficie celular capaz de modular la activación de la inmunidad innata. TARM1 participa en vías impulsadas por receptores que influyen en la producción de citocinas, las cascadas de señalización inflamatoria y la comunicación cruzada entre neutrófilos, macrófagos y otras poblaciones de leucocitos. La regulación alterada de la señalización asociada a TARM1 se ha relacionado con contextos de desregulación inmunitaria relevantes para la inflamación y la defensa del hospedador, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos en modelos de inmunología de ratón.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TARM1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tarm1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tarm1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tarm1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TARM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tarm1 para la investigación de la señalización de TARM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tarm1 críticos para la función de TARM1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tarm1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TARM1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TARM1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tarm1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TARM1 (m) y el plásmido HDR TARM1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tarm1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tarm1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.