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TARDBP双切口酶质粒(m) | sc-433014-NIC | 20 µg | $410.00 |
Tardbp 编码 TARDBP(TDP-43),这是一种以细胞核定位为主的 RNA/DNA 结合蛋白,通过识别富含 UG 的基序来调控 pre-mRNA 剪接、mRNA 稳定性与转运以及微小 RNA(microRNA)的生物发生。TARDBP 参与 RNA 颗粒的动态变化与应激反应,在细胞应激条件下影响转录组完整性与蛋白质稳态。在小鼠研究体系中,Tardbp 常用于研究神经元与胶质细胞的 RNA 代谢、对自身转录本的自我调控反馈,以及与核—胞质转运和翻译调控通路之间的相互作用。TARDBP 功能失调及其错误定位与神经退行性变和蛋白质聚集生物学密切相关,因此是开展 RNA 结合蛋白病理机制研究的重要靶点。
TARDBP 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Tardbp 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Tardbp内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Tardbp的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Tardbp基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。