TAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423266

Visão geral

Tap2 codifica o transportador murino associado ao processamento de antígenos 2 (TAP2), um transportador da família cassette de ligação a ATP (ABC) que forma um heterodímero com o TAP1 para translocar peptídeos derivados do proteassoma do citosol para o retículo endoplasmático, onde são carregados em moléculas de MHC de classe I. Essa atividade é central para o processamento e a apresentação de antígenos, conectando a degradação mediada por ubiquitina–proteassoma, o carregamento de peptídeos no RE e a vigilância imunológica por células T CD8+. A função do TAP2 integra-se ao complexo de carregamento de peptídeos e influencia a qualidade e a diversidade do imunoprotéoma de MHC I, moldando respostas à infecção e ao estresse mediado pelo sistema imune. Alterações na atividade do TAP2 têm sido associadas à expressão reduzida de MHC I na superfície celular e a fenótipos de evasão imune relevantes para a biologia inflamatória e para a pesquisa em imunologia do câncer.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TAP2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tap2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tap2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tap2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TAP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tap2 para a investigação da sinalização de TAP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tap2 críticos para a função TAP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tap2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tap2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TAP2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TAP2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tap2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tap2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.