Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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TAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424683
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TAP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TAP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TAP Anticorpo (53H8): sc-32319
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424683 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Nxf1 de camundongo codifica o TAP, um receptor conservado de exportação com ligação a RNA que, em parceria com o NXT1, promove o transporte em massa de mRNA do núcleo para o citoplasma através do complexo do poro nuclear. O TAP reconhece partículas ribonucleoproteicas mensageiras maduras (mRNPs) por meio de interações com complexos adaptadores como o TREX e contribui para o acoplamento entre transcrição, splicing e processamento da extremidade 3′ com a exportação nuclear. Ao controlar a disponibilidade de transcritos para tradução, o Nxf1 influencia a proteostase, a progressão do ciclo celular e programas de expressão gênica responsivos ao estresse. A perturbação da maquinaria de exportação de mRNA está associada à expressão gênica desregulada na biologia do câncer e a mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neurodegenerativas, tornando o Nxf1 um ponto útil para estudar patologias associadas ao metabolismo de RNA.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TAP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nxf1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nxf1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nxf1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TAP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nxf1 para a investigação da sinalização de TAP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nxf1 críticos para a função TAP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nxf1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nxf1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TAP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TAP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nxf1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nxf1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.