SURF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423223

概要

Surf6 は、保存性の高い核小体タンパク質 SURF-6 をコードしており、pre-rRNA のプロセシングやリボソームサブユニットの成熟に関与することで、リボソーム生合成および核小体の恒常性維持に関与しています。SURF-6 は、RNA 結合や核小体の組織化に関わる過程にも関与し、タンパク質合成能を細胞の成長・増殖プログラムと協調させます。核小体機能およびリボソーム産生の破綻は、細胞ストレス応答、翻訳の変化、増殖不全と密接に関連しているため、Surf6 は哺乳類システムにおけるゲノム安定性や増殖制御の研究で重要な対象となります。マウスモデルでは、Surf6 の機能撹乱は、リボソーム生合成が発生表現型や疾患に関連する核小体経路の制御異常とどのように交差するかを検討するための、扱いやすい切り口を提供します。

SURF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSurf6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Surf6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Surf6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SURF-6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SURF-6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Surf6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SURF-6の機能に不可欠なSurf6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Surf6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SURF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSURF-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Surf6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SURF-6 HDRプラスミド（m）および SURF-6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSurf6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSurf6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。