Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-423069-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Superoxide Dismutase 1/SOD1ダブルニカースプラスミド（m）およびSuperoxide Dismutase 1/SOD1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Sod1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Superoxide Dismutase 1/SOD1 抗体 (B-1): sc-271014
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Superoxide Dismutase 1/SOD1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-423069-NIC | 20 µg | $410.00 |
マウスSod1は、スーパーオキシドジスムターゼ1（SOD1）をコードしている。SOD1は細胞質に局在するCu/Zn依存性の抗酸化酵素で、スーパーオキシドラジカルを過酸化水素と酸素へ不均化反応により変換し、タンパク質・脂質・核酸に対する酸化傷害を抑制する。SOD1活性は、グルタチオン系やカタラーゼ／ペルオキシレドキシン系などを含む細胞のレドックス恒常性維持経路と統合されており、酸化ストレス下でのミトコンドリア機能、プロテオスタシス、炎症シグナルにも影響する。SOD1機能の破綻や凝集は神経変性および運動ニューロンの脆弱性との関連で広く研究されており、Sod1発現の変化は老化、代謝ストレス、毒性物質曝露における酸化傷害のモデル化にも用いられる。そのためSod1は、活性酸素種（ROS）の処理機構、ストレス応答シグナル伝達、ならびにそれに続く損傷関連経路の機序研究において一般的な標的となっている。
Superoxide Dismutase 1/SOD1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Sod1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Sod1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Sod1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Sod1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。