SULT1C1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423200

Descripción general

Sult1c1 codifica la sulfotransferasa citosólica SULT1C1, una enzima de fase II del metabolismo de xenobióticos que transfiere un grupo sulfato desde PAPS a sustratos que contienen grupos hidroxilo y amina. Esta reacción de sulfatación normalmente aumenta la solubilidad en agua y modula la bioactividad, el transporte y la eliminación de moléculas pequeñas, contribuyendo así a la homeostasis química celular. En tejidos de ratón, SULT1C1 participa en la desintoxicación coordinada y en la señalización metabólica junto con otras vías de conjugación, como la glucuronidación y la conjugación con glutatión. Las alteraciones en la actividad de las sulfotransferasas se han asociado con diferencias en la susceptibilidad al estrés químico, el procesamiento de compuestos disruptores endocrinos y respuestas tisulares vinculadas a la inflamación, lo que convierte a Sult1c1 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de toxicología y metabolismo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SULT1C1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sult1c1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sult1c1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sult1c1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SULT1C1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sult1c1 para la investigación de la señalización de SULT1C1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sult1c1 críticos para la función de SULT1C1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sult1c1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SULT1C1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SULT1C1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sult1c1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SULT1C1 (m) y el plásmido HDR SULT1C1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sult1c1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sult1c1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.