![Su[fu] Antibody (F-4) - Western Blotting - Image 55082Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.](https://media.scbt.com/product/sufu-crispr-cas9-knockout-plasmid-m-western-blotting_05_50_b_55082.jpg)
CRISPR 데이터가 아님: 이 이미지는 CRISPR 실험 결과를 시각화하기 위한 항체 품질을 보여줍니다.
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Su[fu] CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423973
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- Su[fu] CRISPR/Cas9 녹아웃(KO) 플라스미드 (m)은 플라스미드 풀로, 각 플라스미드는 Cas9 뉴클레아제와 표적 특이적 20nt 가이드 RNA(gRNA)를 암호화하며, GeCKO v2 라이브러리에서 유래한 서열을 사용하여 녹아웃 효율을 극대화하도록 설계되었습니다.
- gRNA 서열은 Cas9가 Su[fu] 게놈 위치에서 부위 특이적 이중 가닥 절단(DSBs)을 유도하도록 유도하며, 이는 비동종 말단 결합(NHEJ)을 통해 유전자 녹아웃을 초래합니다
- 푸로마이신 내성 및 RFP 유전자는 LoxP 사이트로 둘러싸여 있어, 안정적인 녹아웃 세포주를 확립한 후 Cre 재조합효소(Cre 벡터: sc-418923)를 통해 선택 마커를 제거할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 Su[fu] Antibody (F-4): sc-137014
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Su[fu] CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m) | sc-423973 | 20 µg | $397.00 |
개요
Suppressor of fused(Sufu)는 Su(fu) 단백질을 암호화하며, Hedgehog 신호전달에서 핵심적인 음성 조절자로 작용해 GLI 전사인자의 활성을 억제하고 배아 패터닝, 세포 운명 결정, 조직 항상성을 조절하는 전사 프로그램을 통제하는 데 기여합니다. 마우스 세포에서 SUFU는 GLI 단백질을 세포질에 격리하고 이들의 가공 및 핵 접근을 조율하는 세포질 스캐폴드로 기능하며, 일차 섬모(primary cilium) 의존적 Hedgehog 경로의 동역학과 통합되어 작동합니다. Sufu에 변이가 생기면 경로의 출력과 하위 유전자 발현이 달라질 수 있어, 발생 신호전달의 작동 논리와 Hedgehog 구동성 세포 표현형을 연구하는 데 중요합니다. SUFU 기능 변화는 질환 관련 모델에서 Hedgehog 신호의 이상 조절과 연관된 것으로 보고되어, 경로를 정밀하게 규명하기 위한 기전적 핵심 지점으로 활용될 수 있음을 뒷받침합니다.
Su[fu] CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sufu 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sufu 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.
다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sufu의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Su[fu] 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.
이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Su[fu] 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sufu 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.
주요 특징
- Su[fu] 기능에 중요한 Sufu 엑손을 표적하는 sgRNA
전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sufu 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
형질전환을 통한 전달과 호환
설계 변형
CRISPRs +/- HDR
- Su[fu] CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Su[fu] CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sufu 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
Su[fu] HDR 플라스미드 (m) 및 Su[fu] HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sufu 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sufu 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.