StAR CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400961

概要

STARは、ステロイド産生急性調節タンパク質（StAR）をコードしており、ミトコンドリア膜に関連する因子として、ステロイドホルモン生合成の開始に必要なコレステロールを外膜から内膜へ移送する律速過程を担います。この過程はCYP11A1によるプレグネノロン産生を支えるとともに、副腎および性腺のステロイド産生細胞におけるcAMP/PKAシグナル伝達、ミトコンドリア動態、脂質トラフィッキングと連動しています。StAR依存的なコレステロール輸送が障害されると、ステロイド産生が乱れ、下流の内分泌制御下にある転写プログラムや細胞ストレス応答も変化します。STAR機能の変異や喪失は先天性副腎ステロイド産生不全の表現型と関連しており、StARはミトコンドリアにおけるコレステロール取り扱い機構およびステロイド産生経路の制御を解明するための重要な研究標的です。

StAR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSTAR遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、STAR内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、STARのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、StARタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、StARシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、STAR欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• StARの機能に不可欠なSTARエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、STARゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• StAR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびStAR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、STAR遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  StAR HDRプラスミド（h）および StAR HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSTARホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSTAR標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。