St3Gal-I CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422935

개요

Mouse St3gal1은 골지체에 상주하는 시알릴전이효소 St3Gal-I을 암호화하며, Galβ1-3GalNAc 구조에 α2,3 결합 시알산을 첨가하여 시알릴화된 코어 1 O-글리칸을 생성하는 반응을 촉매합니다. 점액형(mucin-type) O-글리코단백질의 시알릴화 상태를 형성함으로써 St3Gal-I은 글리칸 매개 단백질 안정성, 수용체 결합, 그리고 세포–세포 또는 세포–기질 상호작용에 영향을 미칩니다. 이러한 활성은 면역 인식, 백혈구 이동, 세포 표면에서의 신호전달 조절과 같은 더 광범위한 글리코실화 의존적 과정에도 기여합니다. ST3GAL1 활성의 변화와 코어 1 O-글리칸의 시알릴화 패턴 변화는 염증 및 종양 연관 글리칸 리모델링과 연관되어 보고되어 왔으며, 따라서 St3gal1은 질병 관련 글리코실화 변화의 기전을 연구하는 데 유용한 표적입니다.

St3Gal-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 St3gal1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 St3gal1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 St3gal1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 St3Gal-I 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 St3Gal-I 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 St3gal1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• St3Gal-I 기능에 중요한 St3gal1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 St3gal1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• St3Gal-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 St3Gal-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 St3gal1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  St3Gal-I HDR 플라스미드 (m) 및 St3Gal-I HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 St3gal1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 St3gal1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.