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SSX7 CRISPR Activationプラスミド (h) | sc-403553-ACT | 20 µg | $397.00 |
SSX7(synovial sarcoma, X breakpoint 7)は、SSXファミリーに属するがん精巣抗原様タンパク質をコードしており、正常組織での発現が限定的であることや、転写制御に関与する点が特徴です。SSX7はクロマチン関連プロセスや、細胞の同一性および増殖に影響する遺伝子発現プログラムの調節に関与すると考えられています。SSXファミリーの発現異常は、腫瘍に関連した転写状態や免疫原性抗原の提示と結び付けられており、がん生物学における分子マーカーとしての有用性を支持します。SSX7を研究することで、形質転換細胞におけるエピジェネティック制御機構、転写抑制/活性化バランス、ならびに下流経路の再編成の理解が深まります。
SSX7 CRISPR活性化プラスミド(h)は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性SSX7の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。
SSX7 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における SSX7 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異(D10AおよびN863A)を有する、触媒活性のないCas9(dCas9)を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。
標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はSSX7転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性SSX7の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のSSX7遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるSSX7依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびSSX7発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるSSX7経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。