SRPK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423158

Visão geral

Mouse Srpk1 codifica a quinase 1 específica de proteínas ricas em serina/arginina (SRPK1), um regulador-chave do splicing de pré-mRNA por meio da fosforilação de proteínas SR, como fatores SRSF, influenciando sua localização nuclear e a montagem do spliceossomo. Ao acoplar sinais de sinalização a decisões de splicing alternativo, a SRPK1 impacta programas de expressão gênica que governam proliferação, respostas ao estresse e diferenciação. A atividade da SRPK1 intersecciona redes de processamento de RNA ligadas ao controle do ciclo celular e à regulação pós-transcricional, tornando-a relevante para estudos de splicing desregulado observado em câncer, neurodegeneração e contextos inflamatórios. Em sistemas murinos, a perturbação de SRPK1 é comumente utilizada para dissecar como a sinalização por quinases de splicing molda isoformas de transcritos específicas de tecido e fenótipos a jusante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SRPK1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Srpk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Srpk1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Srpk1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SRPK1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Srpk1 para a investigação da sinalização de SRPK1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Srpk1 críticos para a função SRPK1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Srpk1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SRPK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SRPK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Srpk1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SRPK1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SRPK1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Srpk1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Srpk1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.