Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Squalene epoxidase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402870-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- Squalene epoxidase Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- Squalene epoxidase 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 Squalene epoxidase 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 SQLE을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 Squalene epoxidase Antibody (H-6): sc-271651
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Squalene epoxidase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-402870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Squalene epoxidase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-402870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SQLE는 스쿠알렌 에폭시다아제(squalene epoxidase)를 암호화하며, 이 효소는 플라빈 의존성 모노옥시게나아제로서 스쿠알렌을 2,3-옥시도스쿠알렌으로 에폭시화하는 반응을 촉매합니다. 이는 콜레스테롤 및 스테롤 생합성에서 초기 단계이면서 속도에 영향을 미치는 단계 중 하나입니다. 소포체에 연관된 효소로서 SQLE는 스테롤 항상성 조절에 기여하고, 메발론산 경로의 플럭스, 지질방울(lipid droplet) 동역학, 막 조성에 대한 피드백 조절과 통합적으로 연결됩니다. SQLE 활성의 교란은 세포 지질 프로파일을 재구성하여 신호전달 플랫폼과 스트레스 조건에서의 대사 적응에 영향을 줄 수 있습니다. SQLE가 관여하는 스테롤 생합성 조절의 변화는 여러 질병 맥락에서 관찰되는 이상지질혈증 관련 표현형 및 대사 재프로그래밍과 연관되어 왔으며, 이는 SQLE가 지질 대사 연구에서 기전적 핵심 지점으로 활용될 수 있음을 뒷받침합니다.
Squalene epoxidase 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 SQLE 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 SQLE 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 SQLE의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, SQLE 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.