Plasmide Double Nickase (h) SPATA2: sc-406210-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SPATA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SPATA2 Double Nickase (h) et le plasmide SPATA2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SPATA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SPATA2 Antibody (B-7): sc-515283
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SPATA2 | sc-406210-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SPATA2 | sc-406210-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SPATA2 (protéine 2 associée à la spermatogenèse) code une protéine adaptatrice impliquée dans la signalisation dépendante de l’ubiquitine et dans des voies de réponse au stress. Il a été rapporté que SPATA2 interagit avec des composants du complexe d’assemblage des chaînes d’ubiquitine linéaires (LUBAC) ainsi qu’avec des régulateurs apparentés, influençant la dynamique de la voie NF-κB, la signalisation inflammatoire et les décisions de survie cellulaire. Au travers de ces interactions, SPATA2 est étudiée dans le contexte de la protéostasie, de l’équilibre apoptose/nécrose et du réglage fin des voies de l’immunité innée. Une dérégulation de ces processus est pertinente pour la biologie du cancer et les mécanismes des maladies inflammatoires, ce qui étaye son utilisation comme cible dans des études de dissection des voies de signalisation.
SPATA2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SPATA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SPATA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SPATA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SPATA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.