SPACR CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406681

개요

IMPG1는 SPACR이라는 큰 분비형 프로테오글리칸을 암호화하며, 이는 망막의 광수용체 사이(interphotoreceptor) 기질의 핵심 구조 성분입니다. SPACR은 광수용체 외절과 망막색소상피(RPE) 사이의 부착과 간격 유지에 기여합니다. SPACR은 광범위한 당화(glycosylation)와 다른 세포외기질 구성 요소들과의 상호작용을 통해 기질의 조직화, 신호 분자의 확산, 그리고 광수용체 항상성 유지에 관여합니다. IMPG1의 기능 이상은 황반이상증을 포함한 유전성 망막 질환과 연관되어 있어, 세포외기질 무결성과 광수용체 생존 경로 연구에서 그 중요성이 부각됩니다. 또한 SPACR은 망막에 풍부한 기질 단백질로서, 신경상피에서 세포 주위(pericellular) 기질이 세포–세포 간 소통과 스트레스 반응을 어떻게 조절하는지 조사하는 데에도 활용됩니다.

SPACR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 IMPG1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 IMPG1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 IMPG1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SPACR 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SPACR 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 IMPG1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SPACR 기능에 중요한 IMPG1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 IMPG1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SPACR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SPACR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 IMPG1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SPACR HDR 플라스미드 (h) 및 SPACR HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 IMPG1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 IMPG1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.