Sox-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401217

概要

SOX4は転写因子Sox-4をコードしており、これは高移動度群（HMG）DNA結合タンパク質として、発生および組織恒常性の過程で系譜特異化、分化、ならびに細胞運命決定を制御します。Sox-4はWnt/β-カテニンおよびTGF-β/SMADシグナル伝達に関連する転写プログラムに関与し、細胞の状況に応じて上皮間葉転換（EMT）、細胞周期制御、アポトーシスに影響を及ぼし得ます。SOX4の発現異常は、複数のがん研究や免疫学研究の場面で観察される、前駆細胞維持の破綻や異常な転写ネットワークと関連づけられています。遺伝子発現の結節的な制御因子として、Sox-4はクロマチンに関連した転写回路や経路間クロストークへの影響という観点からもしばしば研究されています。

Sox-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSOX4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SOX4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SOX4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Sox-4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Sox-4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SOX4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Sox-4の機能に不可欠なSOX4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SOX4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Sox-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSox-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SOX4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Sox-4 HDRプラスミド（h）および Sox-4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSOX4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSOX4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。