Sox-21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406354
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sox-21 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sox-21, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sox-21 Anticorpo (2G10): sc-293461
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sox-21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406354 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SOX21 codifica o fator de transcrição Sox-21, uma proteína de ligação ao DNA do tipo high-mobility group (HMG) box que regula programas de comprometimento de linhagem e de diferenciação em tecidos ectodérmicos e neurais. O Sox-21 participa de redes transcricionais que se cruzam com as vias de sinalização Notch e Wnt e pode modular o equilíbrio entre a manutenção de progenitores e a maturação neuronal por meio de repressão ou ativação gênica dependente do contexto. Durante o desenvolvimento, contribui para a especificação do destino celular e o padrão de organização dos tecidos, tornando-se um nó útil para estudar o controle transcricional da neurogênese e da diferenciação epidérmica. A expressão desregulada de SOX21 foi relatada em múltiplos tipos tumorais e em estados de diferenciação aberrantes, o que sustenta a investigação de seus papéis em programas transcricionais oncogênicos e em transições de estado celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sox-21 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SOX21 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SOX21, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SOX21 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sox-21.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SOX21 para a investigação da sinalização de Sox-21, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SOX21 críticos para a função Sox-21
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SOX21 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sox-21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Sox-21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SOX21. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sox-21 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Sox-21 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SOX21 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SOX21 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.