Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) SOCS-3: sc-419666-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)SOCS-3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SOCS-3 (m) y el plásmido de doble nickasa SOCS-3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Socs3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SOCS-3 Anticuerpo (6A463): sc-73045
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) SOCS-3 | sc-419666-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen **Socs3** de ratón codifica el supresor de la señalización de citocinas 3 (**SOCS-3**), un inhibidor de retroalimentación rápida que atenúa la señalización de citocinas y factores de crecimiento al unirse a las quinasas **JAK** y dirigir los complejos de señalización hacia su recambio mediado por ubiquitina. SOCS-3 se induce con fuerza aguas abajo de la activación de **STAT** y limita la señalización **JAK/STAT** en tejidos inmunitarios y metabólicos, modulando las salidas inflamatorias, la polarización de macrófagos y las respuestas de fase aguda. Mediante la modulación de vías vinculadas a las citocinas de la familia de **IL-6** y a la señalización de la leptina, SOCS-3 influye en la sensibilidad a la insulina, la homeostasis energética y las respuestas tisulares al estrés. La expresión o actividad desregulada de SOCS-3 se estudia con frecuencia en contextos de inflamación crónica, síndrome metabólico y redes de citocinas asociadas al cáncer, donde la amplitud y la duración de la señalización son variables críticas.
SOCS-3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Socs3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Socs3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Socs3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Socs3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.