SOAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423068
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SOAT1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SOAT1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SOAT1 Anticorpo (A-11): sc-136959
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SOAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423068 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Soat1 de camundongo codifica a esterol O-aciltransferase 1 (SOAT1), uma enzima de membrana do retículo endoplasmático que esterifica colesterol livre em ésteres de colesterol usando substratos acil-CoA de ácidos graxos de cadeia longa. Essa reação sustenta a homeostase do colesterol, a biogênese de gotículas lipídicas e a remodelação de lipídios de membrana, vinculando a SOAT1 ao armazenamento lipídico celular e às respostas ao estresse do RE. A atividade da SOAT1 se cruza com vias de tráfego de colesterol e de metabolismo de lipoproteínas e pode influenciar a formação de células espumosas e o manejo de lipídios por macrófagos. O acúmulo desregulado de ésteres de colesterol dependente de SOAT1 tem sido associado à inflamação metabólica e a patologias impulsionadas por lipídios, tornando o Soat1 um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos de doença metabólica e relacionados à aterosclerose.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SOAT1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Soat1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Soat1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Soat1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SOAT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Soat1 para a investigação da sinalização de SOAT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Soat1 críticos para a função SOAT1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Soat1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SOAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SOAT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Soat1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SOAT1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SOAT1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Soat1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Soat1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.