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SLP-76双切口酶质粒(h) | sc-401421-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLP-76双切口酶质粒(h2) | sc-401421-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LCP2 编码 SLP-76,这是一种胞质适配蛋白,负责在造血细胞中协调免疫受体下游的信号转导。T 细胞受体和 Fc 受体被激活后,SLP-76 会与 LAT、GADS、VAV1、ITK 和 PLCγ1 组装成多蛋白复合物,推动磷酸化级联反应,从而引发钙离子通量、MAPK 激活、细胞骨架重塑以及整合素介导的黏附。通过这些通路,SLP-76 调控淋巴细胞的激活、发育与免疫突触形成,使 LCP2 成为研究免疫信号网络拓扑结构的关键节点。SLP-76 依赖性信号的失调与免疫功能异常表型及炎症反应改变有关,因而在免疫病理机制研究中具有重要意义。
SLP-76 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LCP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LCP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LCP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LCP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。