SLITRK4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414460

Visão geral

SLITRK4 codifica uma proteína transmembranar neuronal da família SLITRK, implicada no crescimento de neuritos, no desenvolvimento de sinapses e em processos de adesão célula–célula que moldam a formação de circuitos neurais. Por meio de motivos extracelulares de repetições ricas em leucina e de interfaces intracelulares de sinalização, a SLITRK4 está associada a vias que regulam a sinaptogênese, o padrão de axônios/dendritos e a modulação da conectividade neuronal. Padrões de expressão no sistema nervoso e a homologia funcional entre proteínas SLITRK sustentam um papel na biologia relevante para o neurodesenvolvimento e para condições neuropsiquiátricas. Alterações na atividade da família SLITRK têm sido investigadas no contexto de disfunção em nível de circuitos, tornando a SLITRK4 um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos neuronais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLITRK4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLITRK4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLITRK4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLITRK4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLITRK4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLITRK4 para a investigação da sinalização de SLITRK4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLITRK4 críticos para a função SLITRK4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLITRK4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLITRK4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SLITRK4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLITRK4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLITRK4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SLITRK4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLITRK4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLITRK4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.