SLC35A5 Plasmide Double Nickase (h): sc-409546-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC35A5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC35A5 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC35A5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC35A5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC35A5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409546-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35A5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409546-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A5 codifica un trasportatore previsto di zuccheri nucleotidici della famiglia dei solute carrier, localizzato nella via secretoria, che sostiene la glicosilazione fornendo donatori di zucchero attivati alle glicosiltransferasi luminali. Influenzando la disponibilità di zuccheri nucleotidici nel reticolo endoplasmatico e nel Golgi, SLC35A5 può modulare l’assemblaggio dei glicani sulle proteine di membrana e secrete, con effetti a valle sul ripiegamento proteico, sul traffico intracellulare e sulle interazioni cellula–cellula. La glicosilazione alterata è una caratteristica comune dei disturbi dello sviluppo e neurologici, così come di fenotipi associati al cancro, rendendo SLC35A5 rilevante per lo studio di come il trasporto di zuccheri nucleotidici plasmi l’omeostasi cellulare. Le applicazioni di ricerca includono l’analisi delle vie di glicosilazione specifiche degli organelli, la mappatura delle variazioni nel glicoproteoma e la valutazione degli impatti sulla secrezione e sulla maturazione dei recettori in modelli cellulari umani.
SLC35A5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC35A5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC35A5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC35A5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC35A5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.