SLC26A3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403891

Übersicht

SLC26A3 kodiert einen membranständigen Anionenaustauscher (auch als DRA bekannt), der an der apikalen Oberfläche von Epithelzellen einen elektroneutralen Cl⁻/HCO₃⁻-Austausch vermittelt und eine wichtige Rolle bei der intestinalen Flüssigkeits- und Elektrolytresorption spielt. Durch die Regulation der Bikarbonatsekretion und der Chloridaufnahme trägt SLC26A3 zur Kontrolle des luminalen pH-Werts sowie zu epithelialen Transportprozessen bei, die mit der CFTR-abhängigen Ionenhandhabung und der mukosalen Homöostase verknüpft sind. Eine Störung oder Fehlregulation von SLC26A3 wurde mit kongenitaler Chloriddiarrhö und weiteren Phänotypen in Verbindung gebracht, die die Epithelbarrierefunktion und inflammatorische Signalwege im Gastrointestinaltrakt betreffen. Seine Expression und Aktivität sind daher relevant für Studien zur epithelialen Differenzierung, Transportphysiologie und entzündungsassoziierten Umgestaltung des Darmmikromilieus.

Das SLC26A3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC26A3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC26A3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC26A3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLC26A3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC26A3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLC26A3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC26A3-Exone abzielen, die für die SLC26A3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC26A3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLC26A3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SLC26A3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC26A3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLC26A3 HDR-Plasmid (h) und SLC26A3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC26A3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC26A3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.