SKIP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407373

개요

INPP5K는 일반적으로 SKIP으로 알려진 이노시톨 폴리인산-5-인산가수분해효소 K를 암호화하며, PtdIns(4,5)P₂ 및 관련 기질을 탈인산화함으로써 세포의 포스포이노시톨 신호전달을 조절하는 포스포이노시타이드 인산가수분해효소입니다. SKIP은 막에서 포스포이노시타이드 조성을 조정해 액틴 세포골격의 조직화, 막 수송, 그리고 국소적 지질 2차 전달자에 의존하는 PI3K/AKT 같은 경로 하위의 신호 전달에 영향을 미칩니다. INPP5K 활성의 변화는 근육 및 신경발달 항상성의 교란과 연관되어 있어, 신경근 기능과 세포 구조에 영향을 주는 선천성 질환 연구에서 중요한 표적이 됩니다. 포스포이노시타이드는 여러 세포 구획과 과정들을 조율하므로, SKIP은 인간 세포에서 막–세포골격 결합과 인산가수분해효소에 의해 조절되는 신호전달 역학을 분석하는 데 유용한 결절점으로 활용됩니다.

SKIP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 INPP5K 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 INPP5K 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 INPP5K의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SKIP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SKIP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 INPP5K 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SKIP 기능에 중요한 INPP5K 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 INPP5K 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SKIP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SKIP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 INPP5K 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SKIP HDR 플라스미드 (h) 및 SKIP HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 INPP5K 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 INPP5K 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.