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Six2慢病毒激活颗粒(m) | sc-422957-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
Six2慢病毒激活颗粒(m2) | sc-422957-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
Six2(sine oculis homeobox homolog 2)是一种同源盒(homeobox)转录因子,在小鼠器官发生过程中调控祖细胞的维持与谱系决定,尤其在肾单位祖细胞自我更新以及颅颌面与骨骼模式形成中发挥重要作用。它在发育相关的转录网络中发挥功能,并整合包括 WNT/β-连环蛋白、FGF、BMP 以及 Notch 相关程序在内的信号输入,从而控制细胞增殖与分化时序。SIX2 活性失调与异常的发育轨迹有关,并与上皮–间质状态变化及增殖程序的改变相关,这些变化与先天畸形和肿瘤生物学具有相关性。在实验体系中,Six2 是解析调控干性、形态发生与组织特化的基因调控回路的关键节点。
Six2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Six2 表达。
Six2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Six2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Six2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Six2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。