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SIRT7双切口酶质粒(m) | sc-431608-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Sirt7 基因编码 SIRT7,这是一种定位于细胞核、依赖 NAD⁺ 的去酰基化酶,在核仁中富集,参与调控核糖体 RNA 转录、染色质组织以及基因组稳定性。SIRT7 通过去乙酰化组蛋白及非组蛋白底物来调节转录程序,并与核糖体生物发生、DNA 损伤应答以及代谢应激信号通路相互联系。在实验模型中,SIRT7 活性异常与增殖失衡、线粒体与代谢重塑以及与年龄相关的细胞表型有关。这些功能使 Sirt7 成为研究核仁稳态、基因表达的表观遗传调控以及应激适应性转录网络机制的有用靶点。
SIRT7 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sirt7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sirt7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sirt7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sirt7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。