SIRT6 Plasmide Double Nickase (m): sc-424467-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SIRT6 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SIRT6 Double Nickase Plasmid (m) e il SIRT6 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Sirt6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SIRT6 Antibody (6C9-D10-D3): sc-517556
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SIRT6 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424467-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT6 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-424467-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sirt6 codifica per la deacilasi e mono-ADP-ribosiltransferasi NAD⁺-dipendente SIRT6, un enzima associato alla cromatina che regola la trascrizione, la stabilità del genoma e l’omeostasi metabolica. Nelle cellule murine, SIRT6 modula la deacetilazione dell’istone H3 alle lisine 9 e 56, collegando lo stato della cromatina alle risposte al danno al DNA, al mantenimento dei telomeri e alla riparazione associata alla replicazione. Interagisce con vie che controllano lo stress ossidativo, l’infiammazione e il metabolismo di glucosio e lipidi, inclusi programmi trascrizionali associati a NF-κB e HIF1A. Un’attività di SIRT6 deregolata è ampiamente utilizzata come punto di partenza meccanicistico per studiare fenotipi legati all’invecchiamento, disfunzioni metaboliche e la riconfigurazione oncogena della trascrizione in modelli murini pertinenti.
SIRT6 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Sirt6 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Sirt6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Sirt6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Sirt6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.