Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SIRT5 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427028-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SIRT5O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SIRT5 (m) e o Plasmídeo Double Nickase SIRT5 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sirt5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SIRT5 Anticorpo (G-2): sc-271635
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SIRT5 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427028-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT5 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-427028-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Sirt5** de camundongo codifica a sirtuína mitocondrial **SIRT5**, uma desacetilase de lisina dependente de **NAD⁺** com atividades marcantes de **dessuccinilase**, **demalonilase** e **deglutarilase**, que ajustam a função de enzimas mitocondriais. Ao reverter modificações acil-lisina não acetiladas, a SIRT5 ajuda a regular o metabolismo central do carbono, a oxidação de ácidos graxos, o ciclo da ureia e o controle de espécies reativas de oxigênio, sustentando assim a homeostase mitocondrial durante estresse nutricional e oxidativo. Alterações na atividade da SIRT5 têm sido associadas na literatura a reprogramação metabólica, desequilíbrio redox e fenótipos de disfunção mitocondrial que se cruzam com vias relevantes para cardiometabolismo e neurodegeneração. Essas características tornam **Sirt5** um alvo útil para investigar o controle pós-traducional do fluxo mitocondrial e da sinalização adaptativa ao estresse em células de mamíferos.
SIRT5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sirt5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sirt5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sirt5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sirt5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.