CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
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SIRT3 Double Nickaseプラスミド (r): sc-437315-NIC
- 対象生物種: rat
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- SIRT3 Double Nickaseプラスミド (r)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- SIRT3ダブルニカースプラスミド（r）およびSIRT3ダブルニカースプラスミド（r2）は、を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
SIRT3 Double Nickaseプラスミド (r) | sc-437315-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT3 Double Nickaseプラスミド (r2) | sc-437315-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIRT3は、ミトコンドリアに局在するNAD+依存性デアセチラーゼをコードしており、脂肪酸酸化、TCA回路、電子伝達系に関与する酵素を脱アセチル化することで、酸化的代謝およびミトコンドリアタンパク質の恒常性を制御します。ミトコンドリアのレドックスバランスを調節することにより、SIRT3は活性酸素種（ROS）の解毒を制御し、エネルギーおよび酸化ストレスに対する適応応答を支えます。SIRT3活性の変化は、代謝疾患、心臓のストレスリモデリング、神経変性、腫瘍代謝といった状況におけるミトコンドリア機能障害やバイオエネルゲティクスの破綻と関連づけられており、ラットモデルを用いた機序研究で一般的な標的となっています。これらの経路により、SIRT3はミトコンドリアの品質管理、ストレスシグナル伝達、アポトーシス関連過程と結び付けられ、いずれも生物医学研究で頻繁に検討されるテーマです。
SIRT3 ダブルニカースプラスミド（r）は、rat 細胞株における 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。