Siglec-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406675

Visão geral

O SIGLEC9 codifica a Siglec-9, uma lectina do tipo imunoglobulina que se liga ao ácido siálico e é expressa predominantemente em neutrófilos, monócitos e em subpopulações de células NK, onde atua como um recetor inibitório. Por meio de sinalização dependente de motivos inibitórios baseados em tirosina de recetores imunitários (ITIM) e do recrutamento de fosfatases como SHP-1/2, a Siglec-9 atenua sinais de ativação a jusante de vias de reconhecimento de padrões e de recetores Fc, modulando a libertação de citocinas, a desgranulação e o burst oxidativo. Ao detetar glicanos sialilados em superfícies do hospedeiro ou microbianas, contribui para a homeostase imunitária e para a modulação da inflamação em interfaces mucosas e vasculares. A sinalização desregulada de SIGLEC9 e as alterações nos padrões de sialilação têm sido estudadas em contextos que incluem doença inflamatória crónica, biologia de infeções e imunossupressão associada a tumores no compartimento mieloide.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Siglec-9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SIGLEC9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SIGLEC9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SIGLEC9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Siglec-9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SIGLEC9 para a investigação da sinalização de Siglec-9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SIGLEC9 críticos para a função Siglec-9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SIGLEC9 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Siglec-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Siglec-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SIGLEC9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Siglec-9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Siglec-9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SIGLEC9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SIGLEC9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.