Siglec-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413805

概要

SIGLEC12はSiglec-12をコードしており、Siglec-12は一部の上皮系および免疫系の環境で発現し、細胞表面に局在する、非典型的なシアル酸結合性の免疫グロブリン様レクチンです。Siglecファミリーの一員として、Siglec-12は糖鎖依存的な認識に関与し、細胞間相互作用、エンドサイトーシス、ならびに免疫受容体関連経路の下流におけるシグナル出力の調節に影響を与え得ます。ヒトのタンパク質は、保存されたモチーフの改変により典型的な抑制性Siglecとは機能的に異なると考えられており、糖鎖—免疫受容体シグナル伝達における分岐（divergence）を研究するうえで有用なモデルとなります。Siglec-12の発現異常は腫瘍生物学や炎症性微小環境の文脈で検討されており、糖鎖修飾依存の表現型や免疫—上皮間クロストークに関する研究を後押ししています。

Siglec-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSIGLEC12遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SIGLEC12内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SIGLEC12のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Siglec-12タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Siglec-12シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SIGLEC12欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Siglec-12の機能に不可欠なSIGLEC12エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SIGLEC12ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Siglec-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSiglec-12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SIGLEC12遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Siglec-12 HDRプラスミド（h）および Siglec-12 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSIGLEC12ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSIGLEC12標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。