Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SHIP-2双切口酶质粒(h): sc-401622-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SHIP-2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SHIP-2双切酶质粒（h）和SHIP-2双切酶质粒（h2）编码针对INPPL1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SHIP-2: sc-166641，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SHIP-2双切口酶质粒(h) | sc-401622-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SHIP-2双切口酶质粒(h2) | sc-401622-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INPPL1 编码 SHIP-2，这是一种含 Src 同源结构域 2（SH2）的肌醇 5-磷酸酶，可将磷脂酰肌醇（3,4,5）-三磷酸（PIP3）水解为磷脂酰肌醇（3,4）-二磷酸（PI(3,4)P2），从而调节 PI3K–AKT 信号的强度与持续时间。通过改变磷脂酰肌醇磷酸（phosphoinositide）库，SHIP-2 影响胰岛素受体信号传导、膜转运、细胞骨架动态以及受体内吞，并进一步作用于葡萄糖稳态和细胞生长相关程序。SHIP-2 活性或表达的改变与胰岛素抵抗及代谢性状相关；而对 PI3K 通路调控的失衡也使 INPPL1 与致癌信号、细胞迁移以及炎症通路串扰等研究相联系。这些功能使 SHIP-2 成为解析信号网络中依赖磷酸酶的反馈机制的一个重要节点。
SHIP-2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 INPPL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对INPPL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏INPPL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了INPPL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。