Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SH2-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422909
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SH2-B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SH2-B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SH2-B α/β/γ/δ Anticorpo (C-11): sc-514142
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SH2-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422909 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Sh2b1 de camundongo codifica a proteína adaptadora SH2-B, um arcabouço citoplasmático de sinalização que acopla receptores tirosina-quinase ativados e receptores de citocinas a vias downstream como JAK/STAT, PI3K–AKT e MAPK. Por meio de seu domínio SH2 e de motivos de interação proteína–proteína, a SH2-B modula a amplitude e a duração dos sinais, influenciando a proliferação celular, a diferenciação e a regulação metabólica. A sinalização dependente de Sh2b1 é amplamente estudada no contexto da homeostase energética e de redes responsivas à insulina e à leptina, e alterações na função de SH2B1 têm sido associadas a fenótipos envolvendo desregulação metabólica e controle neuroendócrino. Em sistemas imunes e neuronais, a SH2-B também contribui para eventos de sinalização mediados por receptores que moldam respostas inflamatórias e processos associados a sinapses/neuritos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SH2-B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sh2b1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sh2b1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sh2b1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SH2-B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sh2b1 para a investigação da sinalização de SH2-B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sh2b1 críticos para a função SH2-B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sh2b1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SH2-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SH2-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sh2b1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SH2-B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SH2-B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sh2b1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sh2b1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.