Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SF2/ASF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400737-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SF2/ASFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SF2/ASF (h) e o Plasmídeo Double Nickase SF2/ASF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SRSF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SF2/ASF Anticorpo (96): sc-33652
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SF2/ASF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400737-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SF2/ASF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400737-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano SRSF1 codifica o fator de splicing SF2/ASF, uma proteína ligadora de RNA rica em domínios SR que acopla o splicing do pré-mRNA à exportação, estabilidade e tradução do mRNA. Ao reconhecer intensificadores exônicos de splicing e coordenar a montagem do spliceossomo, o SF2/ASF molda programas de splicing alternativo que influenciam a progressão do ciclo celular, a apoptose e a expressão gênica responsiva ao estresse. A atividade de SRSF1 é integrada a vias de sinalização dependentes de fosforilação e a redes de processamento de RNA, incluindo a regulação de isoformas de transcritos que modulam saídas associadas a MAPK/PI3K. A expressão desregulada de SRSF1 ou o controle de splicing alterado têm sido associados ao uso aberrante de isoformas e a fenótipos oncogênicos em múltiplos contextos tumorais, tornando-o um nó-chave para o estudo de mecanismos de doença impulsionados por processamento de RNA.
SF2/ASF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SRSF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SRSF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SRSF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SRSF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.