Selenoprotein K CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407002

概要

SELENOKは、セレノシステインを含有する小型の小胞体（ER）膜タンパク質であるセレノプロテインKをコードしており、免疫細胞や分泌細胞におけるレドックス恒常性の維持を支えます。セレノプロテインKはER関連の品質管理に関与し、DHHC6パルミトイルトランスフェラーゼ複合体との相互作用を介してカルシウムフラックスおよびタンパク質のパルミトイル化と関連づけられており、受容体シグナル伝達や膜構造の組織化に影響を与えます。また、炎症性ストレスや代謝ストレス下における免疫細胞の効率的な活性化、酸化ストレス応答、ならびにプロテオスタシスの維持に寄与します。SELENOK活性の変化は、炎症シグナルの制御異常や、免疫介在性疾患および神経変性疾患の生物学に関連する表現型と関連していることが報告されています。

Selenoprotein K CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSELENOK遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SELENOK内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SELENOKのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Selenoprotein Kタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Selenoprotein Kシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SELENOK欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Selenoprotein Kの機能に不可欠なSELENOKエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SELENOKゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Selenoprotein K CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSelenoprotein K CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SELENOK遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Selenoprotein K HDRプラスミド（h）および Selenoprotein K HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSELENOKホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSELENOK標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。