Sall2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405839-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Sall2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Sall2 Double Nickase Plasmid (h) e il Sall2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SALL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Sall2 Antibody (PL-A12): sc-135619
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Sall2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sall2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SALL2 codifica un fattore di trascrizione a dita di zinco implicato nella determinazione del destino cellulare, nello sviluppo neuronale e nel mantenimento dell’omeostasi epiteliale attraverso la regolazione sequenza-specifica dell’espressione genica. Sall2 partecipa a programmi trascrizionali che si intersecano con il controllo del ciclo cellulare, i segnali di differenziamento e la segnalazione di risposta allo stress, influenzando processi quali proliferazione, apoptosi e impegno di linea cellulare. Alterazioni dell’espressione di SALL2 o della sua attività regolatoria sono state associate a una disregolazione di vie di sviluppo e a reti trascrizionali correlate ai tumori, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici della regolazione genica. In quanto proteina nucleare legante il DNA, Sall2 rappresenta un punto di accesso gestibile per analizzare la logica di promotori/enhancer e il ricollegamento delle vie a valle in modelli cellulari umani.
Sall2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SALL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SALL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SALL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SALL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.