Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SAHH Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402617-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SAHHO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SAHH (h) e o Plasmídeo Double Nickase SAHH (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AHCY. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SAHH Anticorpo (A-11): sc-271389
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SAHH Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402617-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SAHH Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402617-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AHCY codifica a S-adenosil-homocisteína hidrolase (SAHH), uma enzima conservada que hidrolisa a S-adenosil-homocisteína em adenosina e homocisteína, aliviando assim a inibição por produto das metiltransferases dependentes de S-adenosilmetionina. Ao controlar os níveis intracelulares de SAH, a SAHH sustenta a regulação dependente de metilação do metabolismo de DNA, RNA, proteínas e lipídios e influencia o fluxo do metabolismo de um carbono e do ciclo da metionina. Alterações na atividade de AHCY podem deslocar o potencial de metilação celular, afetando o estado epigenético, programas transcricionais e a homeostase de metabólitos. O desequilíbrio na relação SAH/adenosina e mudanças na dinâmica de metilação têm sido associados a fenótipos metabólicos e neurológicos e são frequentemente investigados em estudos sobre estresse redox e biologia relacionada ao fígado.
SAHH O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AHCY em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AHCY. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AHCY. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AHCY interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.