非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
S-100 β chain CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-422787
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- S-100 β chain CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在S-100 β chain基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：S-100 β chain: sc-393919，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
S-100 β chain CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-422787 | 20 µg | $397.00 |
概述
S100b 编码 S-100 β 链，这是一种结合 Ca2+ 的 EF-hand 蛋白，主要富集于星形胶质细胞及其他胶质细胞群体，在细胞内作为信号调节因子、在细胞外作为旁分泌因子发挥作用。S-100 β 通过与细胞骨架和酶类靶标进行钙依赖性相互作用，影响神经突起延伸、细胞周期进程和应激反应，并可介入受体介导的信号传导，例如与 RAGE 相关、最终汇入 MAPK 和 NF-κB 程序的通路。在中枢神经系统中，S100b 被广泛用作胶质细胞标记物，并与神经炎症、血脑屏障调控以及对氧化或代谢应激的反应相关。多种神经系统疾病与神经退行性疾病模型以及损伤范式中均报道了 S100b 表达改变，支持其作为解析胶质细胞—神经元通讯与炎症信号网络的有用工具。
S-100 β chain CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中S100b基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对S100b基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏S100b开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使S-100 β chain蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建S100b缺失的细胞模型，用于S-100 β chain信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 S-100 β chain 功能至关重要的 S100b 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 S100b 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 S-100 β chain CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 S-100 β chain CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 S100b 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 S-100 β chain HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 S-100 β chain HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由S100b同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定S100b靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。